ПАП-тест з верифікацією HSIL (p16, Ki67)

Біоматеріал набирається лише у спец. середовище. 

ПАП-тест з визначенням p16 та Ki-67 — це розширене цитологічне дослідження клітин шийки матки, яке поєднує морфологічну оцінку цервікального епітелію з імуноцитохімічним виявленням біомаркерів трансформувальної активності вірусу папіломи людини високого канцерогенного ризику.

Матеріал отримують із поверхні шийки матки та цервікального каналу за допомогою спеціальної цитологічної щіточки. Спосіб фіксації й підготовки препарату визначається валідованою методикою лабораторії; переважно дослідження виконується на матеріалі рідинної цитології.

Під час стандартного ПАП-тесту оцінюють морфологічні зміни клітин відповідно до класифікації Bethesda. Додаткове імуноцитохімічне дослідження визначає одночасну експресію білків:

• p16INK4a — сурогатного маркера порушення регуляції клітинного циклу, пов’язаного з трансформувальною інфекцією ВПЛ високого канцерогенного ризику;
• Ki-67 — маркера активної клітинної проліферації.

У нормальних клітинах шийки матки одночасна експресія p16 і Ki-67 не очікується. Виявлення обох маркерів в одній епітеліальній клітині свідчить про порушення контролю клітинного циклу, асоційоване з трансформувальною ВПЛ-інфекцією, та вказує на підвищений ризик наявності цервікального інтраепітеліального ураження високого ступеня — CIN2+/CIN3+.

Дослідження допомагає диференціювати транзиторну ВПЛ-інфекцію і доброякісні реактивні зміни від процесів із вищою ймовірністю передракової трансформації, уточнити індивідуальний ризик та визначити подальшу тактику ведення пацієнтки. Подвійне забарвлення p16/Ki-67 є додатковим методом сортування результатів цервікального скринінгу, а не самостійним тестом для встановлення діагнозу HSIL або раку шийки матки.

урогенітальний зішкріб

Перед здачею урогенітального матеріалу на всі дослідження, крім цитологічних (Цитологічні дослідження (мазок жіночий), ПАП-тест, ПАП-тест на основі рідинної цитології), необхідно протягом 2-х тижнів виключити прийом антибактеріальних та протимікробних препаратів, якщо інше не обумовлено лікарем.
При контролі лабораторних показників у динаміці рекомендується проводити лабораторні дослідження за однакових умов: здавати біоматеріал в одній лабораторії, у однаковий час доби, тощо.
Про прийом лікарських препаратів необхідно повідомити співробітників у відділенні. 

Взяття біоматеріалу у вагітних і незайманих - здійснює тільки лікар.
Взяття урогенітального біоматеріалу проводиться з 14 років для дівчат, які живуть статевим життям. Дівчатам з 14 до 16 років  (які живуть статевим життям) необхідно набирати у/г біоматеріал тільки у разі усної згоди* одного з батьків/опікунів.
*Усна згода батьків - це їхня присутність при оформленні замовлення на у/г дослідження.
Батьки/опікуни повинні надати свідоцтво про народження дитини та документ, що засвідчує особу батьків/опікунів.
Дівчатам з 16 років, які живуть статевим життям – можемо набирати у/г біоматеріал без згоди батьків.
Протягом 3-х діб перед здачею дослідження утриматися від статевих контактів.
Протягом 3-х днів виключити вживання алкоголю.

Жінкам:

• В день здачі проводиться туалет зовнішніх статевих органів теплою мильною водою, не допускаючи попадання мильної води у піхву.
• Протягом 3 годин до взяття урогенітального матеріалу утриматися від сечовипускання (виняток - цитологія, ПАП-тест та ПЛР ВПЛ). 
• Урогенітальний матеріал слід здавати через 3 -5 днів після закінчення менструації. У період клімаксу (пременопаузи, менопаузи, постменопаузи), а також при будь-якому порушенні тривалості менструального циклу (аменореї, дисменореї і т.д.) допускається проводити взяття в будь-який день циклу при відсутності кровотечі.
• За 3 дні необхідно виключити спринцювання, рекомендовано припинити використання будь-яких вагінальних таблеток, кульок, свічок - як лікувальних, так і протизаплідних (Фарматекс, Пантекс-Овал, кліон Д, Поліжинакс, інші) та інших препаратів місцевого призначення. Скасування препаратів необхідно узгодити з лікуючим лікарем.
• Мазок слід брати до гінекологічного огляду, кольпоскопії або не раніше ніж через 48 годин після цих маніпуляцій.
• Урогенітальний матеріал необхідно набирати перед проведенням трансвагінального УЗД.

Спеціальні умови зберігання біологічного матеріалу:

• ПАП-тест на основі рідинної цитології - біоматеріал набирається тільки в спец. середовища. Припустимо зберігання при температурі +15 °C до + 30 °C не довше 30 (діб).
  
  Не рекомендується здавати дослідження ПАП- тест та цитологічний мазок в один день.
  Допустимий інтервал між цими дослідженнями 2 місяці. 

Для виконання дослідження з архівного матеріалу необхідно:

• оформити заявку у відділенні Смартлаб (або по телефону 0800-750-070) протягом 4-х днів (транспортне середовище для ПЛР досліджень);
• лабораторія оцінить можливість виконання даного дослідження з архівного матеріалу;
• відповідь пацієнту нададуть по телефону протягом 5 робочих годин з моменту оформлення заявки;
• оплатити замовлення необхідно у відділенні Смартлаб не пізніше 4-го дня з моменту взяття біологічного матеріалу. 

Характеристики менструального циклу:

• Тривалість і день циклу.
• Тимчасова менопауза, менопауза (тривалість).
• Аменорея І-ІІ (припинення менструації).
• Вагітність (термін).
• Клінічний діагноз - ерозія, міома, ВМС, видалений цервікальний канал і ін. 

оцінка якості мазка: в разі отримання незадовільного для проведення аналізу необхідно повторити, але бажано не раніше ніж через 3 тижні; 

у разі отримання задовільного для оцінки, але обмеженого (наприклад, за недостатньою кількістю клітин циліндричного епітелію), можна оцінити виявлені зміни і виявити причини, які могли призвести до обмежень в отриманні повноцінного матеріалу і повторити через 3 тижні;

оцінка виявлених змін і проведення подальшого обстеження і лікування відповідно до прийнятих рекомендацій з ведення жінок з патологією шийки матки.

при виявленні HSIL, ASC-H, AGC, підозри на інвазивний процес або позитивного результату на ВПЛ 16 чи 18 типу дослідження p16/Ki-67 не повинно використовуватися для відтермінування кольпоскопії та біопсії; такі результати потребують подальшого ведення відповідно до чинних клінічних протоколів незалежно від результату подвійного забарвлення;

позитивний результат p16/Ki-67 свідчить про підвищений ризик CIN2+, але не є остаточним підтвердженням HSIL; морфологічна верифікація передракового ураження здійснюється за результатами гістологічного дослідження біоптату шийки матки;

негативний результат знижує ймовірність клінічно значущого передракового ураження, але не виключає його повністю; результат необхідно оцінювати в сукупності з віком пацієнтки, результатами ВПЛ-тестування, ПАП-тесту, попереднім анамнезом, кольпоскопічними та гістологічними даними.

ЗНИЖЕННЯ РІВНЯ:

показання до призначення:

• позитивний результат тестування на ВПЛ високого канцерогенного ризику для уточнення ймовірності клінічно значущого ураження шийки матки;
• позитивний ВПЛ-тест у поєднанні з результатом ПАП-тесту NILM, ASC-US або LSIL;
• цитологічні зміни невизначеного або низького ступеня, коли необхідно диференціювати реактивні зміни від ВПЛ-асоційованої передракової трансформації;
• розбіжність між результатами цитологічного дослідження, ВПЛ-тестування та клінічними або кольпоскопічними даними;
• необхідність стратифікації ризику й визначення подальшої тактики: направлення на кольпоскопію або продовження динамічного спостереження;
• ВПЛ-позитивний результат під час спостереження після раніше виявлених аномальних результатів цервікального скринінгу, кольпоскопії або лікування передракових уражень;
• необхідність уточнення біологічної значущості персистувальної інфекції ВПЛ високого канцерогенного ризику;
•  ВПЛ-позитивний результат, зокрема за відсутності ВПЛ 16 та 18 типів або при результатах цитології NILM, ASC-US чи LSIL.