BRAF (V600) ПЛР

Аналіз BRAF (V600) методом ПЛР є молекулярно-генетичним тестом для виявлення мутацій у кодоні V600 гена BRAF, що активують сигнальний шлях MAPK/ERK і стимулюють проліферацію пухлинних клітин.

Призначення аналізу
Цей тест слугує діагностичним та прогностичним маркером BRAF-асоційованих новоутворень, а також предиктором чутливості до таргетної терапії інгібіторами BRAF/MEK

Опис аналізу
Ген BRAF кодує серін/треонінову кіназу B-Raf, ключовий компонент MAPK-шляху, що регулює клітинний ріст, диференціацію та виживання. Мутації V600 (найчастіше V600E, c.1799T>A; рідше V600K/D/R) спричиняють конститутивну активацію кінази незалежно від сигналів, що лежить в основі онкогенезу; аналіз виконується реал-тайм ПЛР з ДНК пухлини, крові чи кісткового мозку.

Клінічне значення
Виявлення мутації BRAF V600E спостерігається у ~100% хворих на волосатоклітинний лейкоз (ВКЛ), 80-85% папілярного раку щитоподібної залози, 40-60% меланоми, 10-15% колоректального раку (КРР), 4-5% недрібноклітинного раку легені (НДРЛ) та ~50% гістоцітозу з клітинами Лангерганса; асоціюється з агресивністю та резистентністю до EGFR-інгібіторів у КРР.

венозна кров

Перед здачею досліджень необхідно узгодити з лікуючим лікарем прийом і скасування  препаратів.
При контролі лабораторних показників у динаміці рекомендується проводити лабораторні
дослідження за однакових умов: здавати кров в одній лабораторії, у однаковий час доби, тощо.

Про прийом лікарських препаратів необхідно повідомити співробітників  у відділенні.

Припустимо здавати кров в будь-який час доби (не менше 4 годин голодування).
За 3 дні виключити інтенсивні фізичні навантаження.
У день взяття крові, допустимо випити простої води (не мінеральної) без газу.
Кількість води - за потребою організму.
Безпосередньо перед взяттям крові пацієнт повинен перебувати в стані спокою не менше 30 хвилин. 

Напередодні дослідження виключити: 

• прийом жирної їжі та алкоголю;
  
• емоційні навантаження і стрес;
  
• теплові впливи (лазня, сауна);
  
• за 1 годину до проведення дослідження виключити куріння. 

Не слід здавати кров: 

• в день проведення рентгенографії, КТ, МРТ, інструментального обстеження або фізіотерапевтичних процедур,  крапельниць (ЕКГ, УЗД  не є протипоказанням для здачі аналізу крові). 

Загальні правила підготовки:

Дітям до 3-х років мінімальний період голодування - 3-4 години, для немовлят - 2 - 4 годин.
Жінкам необхідно здавати в день менструального циклу, рекомендований лікарем. 

ЗНИЖЕННЯ РІВНЯ:

Не виявлено (негативний): виключає BRAF-шлях як терапевтичну мішень, потреба в інших NGS-панелях (KRAS, NRAS).  

ПІДВИЩЕННЯ РІВНЯ:

Виявлено мутацію (позитивний): підтверджує BRAF-драйвер, вказує на чутливість до BRAF/MEK-інгібіторів (меланома, НДРЛ), гірший прогноз у раку щитоподібної залози; у ВКЛ – патогномонічний маркер. 

показання до призначення:

• Підтвердження/диференційна діагностика ВКЛ, папілярного раку щитоподібної залози.
  
• Оцінка меланоми, НДРЛ, КРР, гістоцітозу Лангерганса перед таргетною терапією.
  
• Пухлини мозку, яєчників, мікросателітно-нестабільний КРР (маркер спорадичності).