Гемолиз и качество биологического образца

Гемолиз и качество биологического образца: от преаналитики до интерпретации результата

Лабораторная диагностика – это отрасль медицины, целью которой является получение достоверной информации для диагностики, прогнозирование течения заболеваний, оценка эффективности лечения и терапевтического мониторинга.

Качество лабораторной информации зависит не только от точности аналитического метода, который происходит непосредственно в лаборатории, а от всего процесса лабораторного тестирования от правильного выбора исследования до корректной интерпретации результатов .

Для обеспечения максимальной точности и достоверности результатов, все этапы лабораторной деятельности должны быть должным образом оптимизированы. В этих целях лаборатория придерживается стандартизированной последовательности проведения исследований.

Весь цикл клинических лабораторных исследований делят на три основных этапа:

Этапы лабораторных исследований

*На этом этапе происходят до 70% всех ошибок

** На этом этапе происходят до 10% всех ошибок

*** На этом этапе происходят до 20% всех ошибок

Преаналитическая фаза является одним из наиболее уязвимых этапов лабораторного исследования, учитывая высокую частоту возникновения ошибок. Это обусловлено сложностью процессов, недостаточным уровнем автоматизации и стандартизации, а также привлечением к выполнению процедур нескольких медицинских работников. По данным различных исследований, на переданалитическую фазу приходится от 31,6 до 53% всех ошибок, связанных с проведением лабораторных исследований, тогда как некоторые авторы сообщают о показателях до 75%. ( Brazilian Journal of Pathology and Laboratory Medicine ).

. Преаналитическая фаза включает все процедуры, предшествующие непосредственному выполнению лабораторного исследования. Ключевые факторы, способные влиять на качество результатов, включают подготовку пациента, условия и технику взятия биологического материала, выбор пробирки, порядок забора крови, правильное наполнение и перемешивание пробирок, маркировку, транспортировку, подготовку образца к анализу.

При взятии венозной крови важно учитывать физиологические факторы, включая прием пищи, физическую нагрузку и изменение положения тела. Длительное наложение жгута также может вызвать венозный застой и изменять концентрацию аналитов . Необходимо соблюдать стандартизированный порядок забора крови.

Однако следует выделить ключевые критерии, при которых биологический образец не может быть принят лабораторией к исследованию , поскольку качество образца оказывает непосредственное влияние на достоверность результата.

Критерии отказа в приеме биологического материала

Медицинская лаборатория может отказать в приеме биологического материала для исследования в случае:

В нашей лаборатории решение об отказе в приеме образца с гемолизом, липемией или иктеричностью принимается в соответствии с внутренними правилами лаборатории и допустимыми пределами интерференции для конкретного исследования.

Среди всех факторов, влияющих на качество биологического образца на преаналитическом этапе, гемолиз занимает особое место. Он является одной из наиболее частых причин отбраковки образцов и может оказывать существенное влияние на достоверность результатов лабораторных исследований.

В то же время важно различать гемолиз in vivo – патологическое разрушение эритроцитов в организме пациента, гемолиз in vitro – разрушение эритроцитов после взятия крови вследствие нарушений на преаналитическом этапе.

На возникновение гемолиза in vitro могут влиять на технику венепункции, использование внутривенных катетеров, сложный забор крови, неподходящий диаметр иглы, длительное наложение жгута, неправильное наполнение пробирки, чрезмерное или неправильное перемешивание образца, транспортировку и центрифугирование.

Гемолиз может оказывать влияние на результаты лабораторных исследований несколькими механизмами. Разрушение эритроцитов приводит к высвобождению внутриклеточных компонентов , изменению состава образца и, в зависимости от метода, аналитической интерференции .

Обнаружить гемолиз образца можно после его центрифугирования по характерной розовой или красной окраске плазмы или сыворотки. В то же время визуальная оценка имеет ограниченную точность и зависит от субъективного восприятия типа образца и концентрации гемоглобина. Поэтому современные автоматизированные анализаторы используют спектрофотометрическое определение и рассчитывают индекс гемолиза (hemolysis. index, HI).

Индекс гемолиза позволяет более объективно оценить степень гемолиза и стандартизировать подход к оценке качества образцов. Однако значение индекса нельзя рассматривать как универсальную величину: соответствие определенной концентрации гемоглобина и пороговые приемлемости зависит от конкретного анализатора и производителя реагентов.

HIL-индексы

Полуколичественная оценка потенциальной интерференции:

• H ( Hemolysis index ) – индекс гемолиза, связанный с наличием свободного гемоглобина;

• I ( Icterus index ) – индекс иктеричности , связанный преимущественно с концентрацией билирубина;

• L ( Lipemia index ) – индекс липемии , характеризующий мутность образца.

Автоматические биохимические анализаторы могут измерять эти показатели спектрофотометрическим методом, оценивая поглощение света образцом на разных длинах волн.

Результаты теста HIL помогают выявить потенциальную интерференцию и определить, может ли гемолиз, иктеричность или липемия повлиять на достоверность результата конкретного лабораторного исследования.

Рассмотрим на примере инструкции к реагенту Ферритин :

В образце определены:

Это означает, что в образце есть определенная степень гемолиза, иктеричности или липемии , но еще не означает, что результат ферритина недостоверен. Далее анализатор сравнивает эти характеристики с пределами интерференции конкретного теста.

Критерий приемлемости: результат остается в пределах ±10% от исходного значения.

Например, H- index соответствует 80 мг/ дл гемоглобина:

• Образец имеет H- index , эквивалентный 80 мг/ дл. Hb : производитель указывает, что для ферритина гемолиз до 100 мг/ дл. Hb не вызывает клиническую интерференцию.

• H- index повышен, но результат ферритина все еще можно считать аналитически приемлемым для воздействия гемолиза.

Но если H- index соответствует 150 мг/ дл ?:

Тогда концентрация свободного гемоглобина превышает предел, валидированный производителем для этого метода.

Какой вывод: производитель не гарантирует, что гемолиз такой степени не влияет на результат более чем ±10%.

Лаборатория должна иметь стандартизированные критерии для выявления и приемлемости гемолизированных образцов, определенные с учетом методов исследования, характеристик анализаторов и клинической значимости потенциальной интерференции.

Гемолиз может изменять результаты лабораторных исследований через несколько устройств. Чаще повышение концентрации аналита связано с высвобождением внутриклеточных компонентов эритроцитов в плазму или сыворотку.

Степень влияния гемолиза на результаты

Аналитическая интерференция – это изменение результата измерения, вызванное присутствием в исследуемом образце вещества, влияющего на аналитическую систему, но не непосредственно измеряемого аналитом .

Качество биологического образца определяется правильностью подготовки пациента, техникой взятия материала, выбором контейнера, соблюдением условий транспортировки и хранения, а также своевременной подготовкой образца к исследованию.

Для объективной оценки качества образцов важное значение имеют HIL-индексы – индексы гемолиза, иктеричности и липемии . В то же время, их необходимо оценивать с учетом конкретного метода, анализатора и рекомендаций производителя реагентов.

Следовательно, стандартизация преаналитических процедур, своевременное выявление и правильная оценка неприемлемых образцов, а также контроль аналитической интерференции, являются необходимыми условиями получения точных, достоверных и клинически значимых результатов лабораторных исследований.

Использованная литература:

https://jbpml.org.br/assessment-of-the-pre-analytical-phase-of-a-clinical-analyses-laboratory/

https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC4062337/

https://www.agappe.com/swiss_en/blog-details/the-phases-of-laboratory-testing.html

https://diagnostics.roche.com/global/en/lab-leaders/article/importance-pre-pre-analytical-phase.html

https://genemod.net/blog/pre-analytical-lab-testing-phase

https://www.cdc.gov/vector-borne-diseases/php/laboratories/quick-reference-tool-for-hemolysis-status.html

https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC7109502/