BRAF (codon V600, ПЛР) (М004)

Дослідження  виконується методом ПЛР в режимі реального часу, та виявляє  мутації в кодоні 600 гену BRAF (V600E/K/D/R), що зустрічається при різних видах пухлин.

Майже всі пацієнти з волосатоклітинною лейкемією та 80% пацієнтів з папілярним раком щитоподібної залози мають дану мутацію, що дозволяє використовувати тестування для підтвердження цих діагнозів 

Ген BRAF кодує білок B-Raf-кіназу, яка бере участь у сигнальному шляху MAPK/ERK — він регулює ріст і поділ клітин. Мутації в кодоні V600 призводять до постійної активації цього шляху, що стимулює неконтрольований ріст пухлинних клітин. Найпоширеніша мутація — BRAF V600E (c.1799T>A). Рідше трапляються V600K, V600D, V600R. 

Клінічна значимість:

  При волосатоклітинному лейкозі (ВКЛ) у 95% випадків виявляється мутація BRAF V600E, що відіграє важливу роль у патогенезі захворювання та відрізняє його від інших В-клітинних лімфопроліферативних захворювань, а також від варіантної форми ВКЛ.

  ВКЛ – особливий варіант хронічного лімфопроліферативного захворювання із залученням кісткового мозку та селезінки, морфологічним субстратом якого служать так звані ворсинчасті В-лімфоцити – клітини зі своєрідним фестончастим краєм цитоплазми у вигляді відростків.

  ВКЛ становить близько 2% всіх дорослих лейкозів та 8% – інших хронічних лімфопроліферативних захворювань. Цей вид лейкозу найчастіше відзначають серед чоловіків середньої вікової групи (співвідношення чоловіків та жінок становить 4:1, медіана віку – понад 50 років).

  Найчастіше (приблизно у 25% випадків) захворювання протікає без типової клінічної картини (як правило, без лейкопенії), тому є необхідність проведення ретельної диференціальної діагностики та визначення мутації гена BRAF V600E.

  Тест на наявність мутації гену BRAF показаний хворим з метастазуючою меланомою та раком легень для відбору пацієнтів для терапії низькомолекулярними інгібіторами білкового продукту мутованого гену BRAF, зокрема вемурафеніб та дафрафеніб. Виникнення мутації BRAF V600E спостерігалося, наприклад, при меланомі, ішемії підшлункової залози Лангерганса або раку яєчників і товстої кишки. Мутації гена BRAF також пов’язані з декількома пухлинами (злоякісна меланома, неходжкінська лімфома, папілярна карцинома щитовидної залози, недрібноклітинна карцинома легенів та аденокарцинома легенів). Перед початком лікування вемурафенібом або дабрафенібомпацієнтам слід провести генетичний тест на мутацію V600 гена BRAF. Вемурафеніб не підходить для пацієнтів зі злоякісною меланомою та варіантом дикого типу гена BRAF. 

Матеріал для дослідження: гістологічні блоки/скельця, мазок пунктату кісткового мозку або переферичної крові /  Кістковий мозок, або переферична кров. 

частка тканини

Загальні вимоги
Біоматеріал (шматочок тканини або органу) обов'язково мають бути в контейнері з 10% розчином формаліну, розчин має покривати біоматеріал. Кожен вид біоматеріалу повинен бути розміщений в окремому контейнері з 10% розчином формаліну та пронумерований. Кришка щільно закрита. Контейнер підписаний: прізвище та ініціали пацієнта, а також який вид біоматеріалу.  

Спеціальні вимоги
Зберігати біоматеріал можно  протягом 3-5 днів  тільки при кімнатній температурі від +18  до +25 С, уникаючи попадання прямих сонячних променів.
Зберігання та транспортування  біоматеріалу можливе тільки у вертикальному положенні. Засохлий біоматеріал є непридатним до дослідження! 

Взяття біологічного матеріалу проводить лікар.  

Дозамовлення можливе протягом року 

Результат гістологічного дослідження залежить від адекватності та якості отриманного матеріалу, правильної фіксації матеріалу, правильності та повноти наданої інформації про пацієнта. За відсутності клінічної інформації, даних анамнезу та опису матеріалу неможливо дати точне та адекватне клінічній картині морфологічний висновок про патологічний процес.  

РЕФЕРЕНСИ:

показання до призначення:

Дослідження призначають пацієнтам з:

• меланомою,
  
• колоректальним раком (КРР),
  
• недрібноклітинним раком легень (НДРЛ),
  
• гістіоцитозом з клітин Лангерганса,
  
• пухлини головного мозку,
  
• волосатоклітинний лейкоз (ВКЛ),
  
• раком щитовидної залози