Clostridium difficile, типування продуцентів А, В, А/В токсинів, якісне визначення, методом ПЛР

Clostridium difficile - це анаеробна грампозитивна бацила, яка є основною причиною антибіотико-асоційованої діареї та псевдомембранозного коліту, під час або після лікування антибіотиками, наприклад, такими як цефалоспорини третього покоління.  

 Хоча 2-3% здорових людей та 20-50% здорових дітей є носіями Clostridium difficile, зазвичай, інфекція має екзогенне походження. Більшість епідемій виникають в умовах стаціонару та в установах довгострокового догляду.

Існують як токсигенні, так і нетоксигенні штами, але тільки токсигенні викликають захворювання у людей. Патогенність залежить від наявності одного або двох, що викликають діарею, токсинів: токсину А і токсину В. Усі токсигенні штами містять токсин, спільно з токсином А або без нього. Обидва токсини ведуть до загибелі клітин кишківника, стимулюють запальну реакцію, яка посилює пошкодження тканин, викликає діарею та псевдомембранозний коліт.

Якісне визначення Clostridium difficile та типування його токсинів (продуцентів А, В, А/В) проводиться за допомогою полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР). Цей метод є швидким і чутливим для виявлення наявності та ідентифікації генетичних матеріалів C. difficile та його токсинів. 

кал

Перед здачею досліджень необхідно узгодити з лікуючим лікарем прийом і скасування  препаратів.
При контролі лабораторних показників у динаміці рекомендується проводити лабораторні дослідження за однакових умов: здавати кал в одній лабораторії, в однаковий час доби, тощо.
Про прийом лікарських препаратів необхідно повідомити співробітників у відділенні.
Дане дослідження оформлюється тільки з приносного біоматеріалу.

Правила взяття біологічного матеріалу

• Для дослідження збирають свіжевиділений кал. Перед збором необхідно помочитись (для виключення можливості потрапляння сечі у фекальні маси).
• При зборі біоматеріалу необхідно уникати контамінації біологічного матеріалу сторонньою мікрофлорою (ретельно мити руки до взяття, використовувати тільки стерильні витратні матеріали та ін.).
• Кал збирається в стерильний одноразовий контейнер спеціальною ложечкою в кількості не менше 10-15 г (обсяг від чайної до столової ложки) і не більше, ніж 1/3 об'єму стерильної ємності (якщо при зборі матеріалу використовують судно, то його попередньо необхідно обробити дез.засобом, а після обробити окропом, щоб видалити сліди дез.засоба).
• На дослідження набираеться середня порція калових мас. Перша порція, або калова пробка, на дослідження не набирається.
  

Для немовлят:

• Допустимо проводити відбір матеріалу з середньої частини фекальних мас ложкою, не торкаючись памперса. 
• Нeвелику частину 1.0-3.0 г (1.0-3.0 мл) збирають з 7-10 різних місць ложечкою контейнера або іншим стерильним предметом. 
• Заборонено використовувати ректальні свічки.

Перед збором матеріалу необхідно:

За 1-3 дні до взяття матеріалу виключити з раціону прийом продуктів, що підсилюють процеси бродіння у кишечнику, молочнокислі продукти, алкоголь.

Не слід здавати:

• Кал, отриманий після клізми, а також після прийому барію (при рентгенологічному обстеженні).
• Жінкам не рекомендується здавати аналіз калу під час менструації. 

За 3-4 дні до дослідження рекомендовано скасувати:

• прийом проносних препаратів, касторового і вазелінового масла;
• припинити введення ректальних свічок;
• виключити прийом препаратів, які можуть забарвлювати кал (залізо, вісмут)
• виключити прийом препаратів, які посилюють перистальтику кишечника.
  

Взяття матеріалу здійснюється до початку антибактеріального і антимікробного лікування (загального і місцевого значення), або через 2-3 тижні після відміни цих препаратів.
Важливо! Скасування або прийом лікарських препаратів обговорюється з лікарем в кожному індивідуальному випадку.  

Спеціальні умови зберігання біологічного матеріалу:

• Для м.Одеси – біологічний матеріал, набраний у стерильну ємність, необхідно доставити у відділення лабораторії протягом 1-2 годин після дефекації. При неможливості доставити матеріал протягом цього часу до відділень м.Одеси, транспортний контейнер необхідно зберігати в холодильнику при температурі +2…+8°С, але не більше 10-12 годин.
• Для інших міст необхідно доставити ранковий кал, набраний у стерильну ємність, протягом 1-2 годин після дефекації.
  

Транспортний контейнер - стерільний пластиковий стаканчик з ложкою і кришкою. на контейнері необхідно вказати ПІБ пацієнта, а також дату і час збору матеріалу.
Неприпустимо приносити кал на дослідження в сірникових або картонних коробках, так як при цьому змінюються форма і консистенція калу, що впливає на результати аналізу. 

не виявлено Clostridium difficile (токсин А/В).

АНАЛІЗАТОР:

РЕФЕРЕНСИ:

ЗНИЖЕННЯ РІВНЯ:

не виявлено Clostridium difficile (продуценти А, В, А/В токсинів).

ПІДВИЩЕННЯ РІВНЯ:

виявлено Clostridium difficile (продуценти А, В, А/В токсинів).

показання до призначення:

• розвиток діареї у пацієнтів, які отримували антибіотики протягом попередніх 2 місяців, а також діареї, що розвинулася через 72 години після госпіталізації;
• при підозрі на псевдомембранозний коліт у пацієнтів, що належать до групи високого ризику: вік старше 65 років, тривала госпіталізація, оперативні втручання, наявність злоякісних пухлин, ниркової недостатності, запальні захворювання товстої кишки, хіміотерапія, прийом інгібіторів протонної кишки;
• після застосування кліндаміцину або лінкоміцину (до 6%), напівсинтетичних пеніцилінів (5-9%), цефалоспоринів.